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罗丹明123Rhodamine123

货号：106633 编号：XFBM69

CAS号：62669-70-9 规格：C21H17ClN2O3

包装：10mg 保质期：360天

保存条件：-20℃干燥避光保存

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   Rhodamine 123（罗丹明 123）

   Rhodamine 123（罗丹明 123）是一种广泛应用于生物医学研究的阳离子型荧光染料，因对线粒体膜电位具有高度敏感性，成为线粒体功能研究的核心工具之一。以下从基本信息、理化特性、作用机制、应用场景及使用注意事项展开详细介绍：

   一、基本信息

               项目                具体内容
化学名称                2-(6-Amino-3-imino-3H-xanthen-9-yl) benzoic acid methyl ester（2-(6 - 氨基 - 3 - 亚氨基 - 3H - 呫吨 - 9 - 基) 苯甲酸甲酯）
CAS 号                62669-70-9
分子式C21H17ClN2O3（盐酸盐形式，最常见商用形态）
分子量                384.82 g/mol（盐酸盐）
外观                亮黄色粉末或结晶性固体
储存条件                -20℃避光、干燥保存；粉末状态下稳定性高（-20℃可保存 2 年以上），溶解后需立即使用或分装于 - 80℃短期保存（避免反复冻融）

   二、核心理化特性

  1. 溶解性：

    •                易溶于水（水溶性优于其他罗丹明类染料，如 Rhodamine B）、甲醇、乙醇等极性溶剂；

    •                可溶于二甲基亚砜（DMSO），但水溶液更适合细胞实验（减少有机溶剂对细胞的毒性）。

  2. 荧光特性：

    • 激发波长（Ex）：约 507-510 nm（最佳激发峰）；

    • 发射波长（Em）：约 529-535 nm（荧光呈明亮的黄绿色）；

    • 荧光量子产率：较高（约 0.9），荧光信号强，检测灵敏度高；

    • pH 敏感性：在中性至弱碱性环境（pH 6.0-8.0）下荧光稳定，强酸或强碱会导致荧光淬灭。

   三、作用机制：线粒体膜电位依赖性积累

   Rhodamine 123 的核心功能依赖于线粒体膜电位（ΔΨm） 的驱动：


  •            线粒体是细胞内产生 ATP 的主要场所，其内膜通过呼吸链维持着内负外正的跨膜电位（正常情况下 ΔΨm 约为 - 180~-220 mV）；

  •            作为阳离子型染料，Rhodamine 123 可通过被动扩散进入线粒体基质，并因膜电位的 “静电捕获” 作用在基质内富集（浓度可达胞质的 100 倍以上）；

  •            当线粒体功能受损（如氧化应激、药物毒性、细胞凋亡早期）时，内膜完整性破坏，ΔΨm 下降或崩溃，Rhodamine 123 无法在基质内积累，导致线粒体荧光信号显著减弱或消失。


   这一特性使其成为线粒体膜电位变化的 “可视化指示剂”，且不影响线粒体的呼吸功能和细胞活性（低浓度下）。

   四、主要应用场景

   1. 线粒体功能与细胞凋亡研究

  • 线粒体膜电位检测：通过荧光显微镜、流式细胞仪或荧光分光光度计定量分析细胞内 Rhodamine 123 的荧光强度，判断线粒体功能状态（如缺血再灌注损伤、神经退行性疾病中线粒体功能异常）；

  • 细胞凋亡早期标记：细胞凋亡早期的典型特征之一是 ΔΨm 下降，Rhodamine 123 可与凋亡特异性标志物（如 Annexin V）联合使用，区分凋亡早期与晚期细胞。

   2. 肿瘤细胞研究与药物筛选

  • 肿瘤细胞识别：肿瘤细胞线粒体代谢活跃，ΔΨm 通常高于正常细胞，Rhodamine 123 在肿瘤细胞内积累更多，可用于肿瘤细胞的荧光标记与分选；

  • 抗肿瘤药物筛选：评估药物（如化疗药、靶向线粒体药物）对肿瘤细胞线粒体的损伤效应，通过荧光强度变化判断药物抑制肿瘤细胞活性的能力。

   3. 微生物与寄生虫研究

  • 细菌 / 酵母线粒体标记：用于观察大肠杆菌、酵母菌等微生物的线粒体形态与分布；

  • 寄生虫检测：如标记疟原虫的线粒体，研究抗疟药物对寄生虫线粒体功能的影响。

   4. 其他应用

  • 细胞内 pH 测量：利用其荧光强度对 pH 的敏感性，作为弱酸性细胞器（如溶酶体）的 pH 探针；

  • 细胞示踪：因荧光稳定且无细胞毒性，可用于活细胞的短期荧光示踪（如细胞迁移实验）。

   五、使用注意事项

  1. 浓度控制：

    •                细胞实验常用浓度为 0.1-10 μM，过高浓度（>20 μM）可能导致线粒体损伤或荧光淬灭，需根据细胞类型（如贴壁细胞、悬浮细胞）优化浓度。

  2. 避光操作：

    •                Rhodamine 123 对光敏感，溶液配制、细胞染色及荧光检测过程中需全程避光（使用棕色试剂瓶、铝箔包裹容器），避免荧光信号衰减。

  3. 染色时间：

    •                活细胞染色通常需 37℃孵育 15-30 分钟，确保染料充分进入线粒体；孵育后需用无染料培养基洗涤 1-2 次，去除胞质中未进入线粒体的游离染料，减少背景荧光。

  4. 干扰因素排除：

    •                离子载体（如缬氨霉素）、线粒体抑制剂（如抗霉素 A、氰化物）会直接影响 ΔΨm，实验中需避免此类试剂的干扰；

    •                细胞内高浓度的金属离子（如 Fe³⁺、Cu²⁺）可能导致荧光淬灭，需确保培养基成分稳定。

  5. 安全性：

    •                虽无明确毒性报告，但仍需避免皮肤直接接触和吸入，实验时佩戴手套、护目镜，操作后及时洗手。

   六、与同类探针的对比

   Rhodamine 123 是线粒体膜电位检测的 “经典探针”，与其他常用探针（如 JC-1、TMRM）相比，优势与差异如下：


               探针                优势                劣势                适用场景
               Rhodamine 123                水溶性好、毒性低、荧光信号强                无法区分 ΔΨm 的轻微变化（仅定性 / 半定量）                常规线粒体功能检测、活细胞示踪
               JC-1                可定量区分 ΔΨm（聚合体 / 单体荧光切换）                水溶性差、需 DMSO 溶解，毒性较高                精确量化 ΔΨm 变化（如药物筛选）
               TMRM（四甲基罗丹明甲酯）                膜通透性高、滞留时间长                荧光量子产率低于 Rhodamine 123                长时间动态监测线粒体膜电位


   综上，Rhodamine 123 因操作简便、安全性高，仍是初学者进行线粒体功能研究的首选探针之一。



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